Konjenital anemilerde yeni nesil dizileme yöntemi

Abstract

Giriş ve Amaç: Konjenital anemiler, kalıtsal kemik iliği yetmezliği, demir metabolizması bozuklukları, eritrosit membran bozuklukları, eritrosit enzim bozuklukları ve hemoglobin sentez bozuklukları olmak üzere beş grupta sınıflandırılabilir. Son yıllarda, tanısı konulamayan olgular, yeni nesil dizileme (YND) yöntemi ile Kemik iliği Yetmezlik /Anemi (KIY/A) Paneli, Tüm Ekzom Analizi (TEA), Tüm Genom Analizi (TGA) uygulanarak incelenmektedir. Tanı koymada, hasta seçimi, klinik semptomların ve tıbbi kayıtların incelenmesi ve bunların YND ile tespit edilen olası genetik varyasyonlar ve mutasyonlar ile ilişkisinin belirlenmesi, ve klinisyen ile genetik değerlendirme merkezinin yakın işbirliği çok önemlidir. Bu çalışmada, merkezimize başvuran konjenital anemili hastaların YND sonuçlarını sunmayı ve literatür çalışmaları ile karşılaştırmayı amaçladık. Olgular ve Yöntemler: Konjenital anemi tanısı ile merkezimize başvuran 11 hastaya (8 kız, 3 erkek) YND analizi yapıldı. Yaş dağılımı 1-25 yıl, ortalama ±SD 8.54±16.9 yıl idi.Olguların detaylı özgeçmişi ve aile öyküsü alındı ve fizik muayeneleri yapıldı. Yazılı hasta onamı alındıktan sonra, alınan 5 cc EDTA’lı kan özel kartlara yüklenerek laboratuvara gönderildi. Laboratuvarda, kartlardan DNA izolasyonu yapıldıktan sonra, hedefeyönelik KIY/A panelinde 214 gen taraması, 20.000 gen taraması yapılan TEA ya da TGA uygulandı Sonuçlar: Hastaların tamamında solukluk yakınması vardı. Yakınmaların başlama süresi 30 gün ile 10 yıl arasındaydı.Yedi olguya KIY/A paneli, üç olguya TEA ve bir olguya TGA uyg ulandı. İki hastaya herediter sferositoz Tip 1, iki hastaya herediter sferositoz tip 2, bir hastaya herediter eliptositoz, bir hastaya Piruvat Kinaz eksikliği+Gama glutamil sistein sentetaz eksikliği, iki hastaya Diamond Blackfan anemisi tip 1, bir hastaya MLASA Sendromu (Miyopati+ Laktik asidoz+ sideroblastik anemi), bir hastaya HbKnossos +δ0-talasemi, ve bir hastaya Kemik iliği yetmezliği tanısı kondu. Tartışma: Konjenital anemili hastaların genetik tanısı karmaşıktır Son yıllarda YND ile gen panelleri oluşturarak veya TEA ve TGA ile sonuçlar lınmaktadır. Averbuch ve ark. membran bozuklukları, enzim eksiklikleri ve diseritropoietik anemi ile ilgili 76 geni ayrı ayrı analiz etmişlerdir, 21 konjenital anemi vakasının 13’ünde mutasyon saptayarak %60 başarı elde etmişlerdir. Li ve ark. 46 konjenital anemi vakasında hedeflenen YND yöntemi kullanılarak 28 olguya (%60,8) tanı koymuşlar. Konjenital anemide YND’nin rutin olarak kullanılması gerektiğini öne sürmüşlerdir. Russo ve ark. akraba olmayan 62 aileden gelen 74 konjenital anemili bireyde 70’den fazla geni analiz ederek %64.5 tanı başarısı elde etmişlerdir. Çok merkezli bir çalışmada konjenital kemik iliği yetmezliğinde hedeflenen YND paneli kullanılarak %85, TEA analizi kullanılarak %94 başarı elde edilmiştir. Merkezimize konjenital anemi tanısı ile başvuran 11 hastanın 11 inde (%100) YND analiz yöntemlerinden KIY/A paneli TEA ve TGA ile kesin tanı konmuştur. Sonuç olarak; konjenital anemilerde YND ile tanı koyma oranı artmıştır. Bu nedenle tanı konamamış konjenital anemisi olan tüm hastalarda YND analizi öneriyoruz.